TITRE    DYNAMIQUE STRUCTURALE ET CONFORMATIONNELLE DE LA FIBRONECTINE PLASMATIQUE    HUMAINE EN SOLUTION: DE SES PROPRIETES D’ORGANISATION EN SOLUTION A LA    REGULATION DE SES FONCTIONS BIOLOGIQUES.
    TITLE    STRUCTURAL AND CONFORMATIONAL DYNAMICS OF HUMAN PLASMA FIBRONECTIN: FROM    ITS MOLECULAR PROPERTIES IN SOLUTION TO THE REGULATION OF ITS BIOLOGICAL    FUNCTIONS.
    AUTEUR    Salima PATEL
    UNIVERSITE    Université de CERGY-PONTOISE
    DATE    10 décembre 2004
    LABORATOIRE    ERRMECe
    DIRECTION DE THESE    Emmanuel PAUTHE
    PARRAINAGE    Emmanuel PAUTHE
RESUME :
Le travail présenté concerne l’étude des propriétés de dynamique structurale et d’assemblage de la matrice extracellulaire (ECM) à travers l’étude d’une macromolécule particulière: la fibronectine (Fn). Dans un premier temps, la dynamique structurale de la Fn est abordée via l’étude du processus de dépliement-repliement induit par effet de température ou d’urée. Ces différentes études révèlent l’existence de différents états structuraux stables de la Fn. Dans un second temps, le processus de repliement de la Fn, suite à un dépliement induit par effet d’urée, a été étudié. Cette étude a permis de mettre en évidence un processus de dépliement "pseudo-réversible" de la Fn. Dans un troisième temps, les propriétés d’auto-assemblage de l’état natif et replié de la Fn sont testées sous différentes conditions de forces ioniques. Nous avons montré à travers ce travail que l’état pré-initial de la molécule ainsi que les conditions de force ioniques en solution ont un effet sur la morphologie et la cinétique de formation des structures auto-assemblées de la molécule.
ABSTRACT:
The principle aim of this work is focused on extracellular matrix (ECM) structural dynamism and self assembly properties through study of fibronectin (Fn) which is an ECM essential component. First, we have studied influence of temperature and urea effect on fibronectin unfolding process to characterize protein structural dynamism. These different studies highlighted presence of different stable structural states of Fn. Second, a study concerning the renaturation process of fibronectin, after a denaturation induced by urea, has been developed. Different data obtained by spectroscopic and hydrodynamic approaches reveal that Fn denaturation process is "pseudo-reversible". Third, self – association properties of these native and refolded states of fibronectin in solution have been investigated under different ionic strength conditions. This study indicates that pre-initial Fn state as well as ionic strength conditions have an effect on morphology and kinetic formation of Fn self-assembly.